Avaliação da imunogenicidade de diferentes formas alélicas da proteí­na recombinante PvAMA-1expressa em Pichia pastoris: impacto da diversidade antigênica / Evaluation of the immunogenicity of different allelic forms of PvAMA-1 protein expressed in Pichia pastoris: impact of antigenic diversity

A malária é um problema de saúde pública no Brasil e no mundo. Em 2016, o número de casos estimado pela Organização Mundial de Saúde foi de 216 milhões. Plasmodium falciparum é a espécie mais prevalente e responsável pelo maior número de mortes no mundo, sobretudo no continente africano. Por outro lado, o Plasmodium vivax é conhecido por sua ampla distribuição geográfica, sendo a espécie que predomina nas Américas, incluindo o Brasil. Nos últimos 20 anos, nosso grupo tem gerado e caracterizado diversas proteínas recombinantes baseadas em antígenos imunodominantes de P. vivax que podem servir como base para o desenvolvimento de uma vacina contra malária. Entre os antígenos de merozoítas, uma das principais proteínas em estudo pelo nosso grupo é o Antígeno 1 de Membrana Apical de P. vivax (PvAMA-1), caracterizado previamente como altamente imunogênico em infecções naturais e em camundongos imunizados, na presença de diferentes adjuvantes. O objetivo do presente estudo foi investigar o efeito da diversidade antigênica dessa proteína no reconhecimento por anticorpos específicos e na indução de imunidade contra o parasita. Para isso, foram geradas seis novas proteínas representando diferentes alelos descritos na natureza: PvAMA-1-Belem, PvAMA-1-Sal-I, PvAMA-1-Chesson-I, PvAMA-1-SK0814-apical, PvAMA-1-Indonesia-XIX e PvAMA-1-PNG_62_MU. As proteínas recombinantes foram expressas em leveduras Pichia pastoris e purificadas em duas etapas cromatográficas. Em seguida, as imunizações em camundongos C57BL/6 foram realizadas com as proteínas administradas de forma isolada, ou em combinação, na presença do adjuvante agonista de TLR3 (Poly I:C). Por ELISA, observamos que todas as formulações foram capazes de induzir anticorpos IgG contra as proteínas homólogas e heterólogas, o que sugere que a diversidade antigênica entre as formas alélicas não compromete o reconhecimento. Os dados gerados no presente trabalho sugerem que uma formulação contendo mistura de diferentes alelos representando a proteína AMA-1 pode ser explorada para o desenvolvimento de uma vacina de ampla cobertura contra o P. vivax

Malaria is a public health problem in Brazil and throughout the world. In 2016, the World Health Organization estimated there were 216 million cases of malaria. Plasmodium falciparum is the most prevalent species and is responsible for the largest number of deaths, especially in the African continent. However, Plasmodium vivax is known for its wide geographic distribution, being the species that prevails in the Americas, including Brazil. In the last 20 years, our group has generated and characterized several recombinant proteins based on immunodominant antigens of P. vivax that can serve as a basis for the development of a malaria vaccine. Among the merozoite antigens, one of the main proteins studied by our group is P. vivax apical membrane antigen-1 (PvAMA-1), previously characterized as highly immunogenic in natural infections and immunized mice, in the presence of different adjuvants. The objective of this study was to investigate the effect of antigenic diversity of this protein in the recognition of specific antibodies and the induction of immunity against the parasite. For this, six new proteins were generated representing different alleles described in nature: PvAMA-1-Belem, PvAMA-1-Sal-i, PvAMA-1-Chesson-i, PvAMA-1-SK0814-apical, PvAMA-1-Indonesia-XIX, and PvAMA-1-PNG_62_MU. Recombinant proteins were expressed in Pichia pastoris yeast and purified by two chromatographic stages. Then, C57BL/6 mice were immunized with these proteins administered in isolation or in combination, in the presence of the TLR3 agonist adjuvant, Poly I:C. Using an enzyme-linked immunosorbent assay, we observed that all formulations induced IgG antibodies against homologous and heterologous proteins. This indicates that antigenic diversity between allele forms does not compromise recognition. This finding suggests that a formulation containing a mixture of different alleles representing the PvAMA-1 protein can be exploited for developing of a wide coverage vaccine against P. vivax

Análise de polimorfismos em genes codificadores de moléculas envolvidas na homeostase do ferro como possíveis biomarcadores de recaída e/ou anemia durante a infecção por Plasmodium vivax

A malária é uma doença parasitária prevalente principalmente em regiões tropicais e subtropicais do mundo. Indivíduos infectados com Plasmodium vivax, mais prevalente espécie do parasito no Brasil, apresentam dentre outras características, a anemia como uma das principais complicações. Além disso, essa espécie é capaz de desenvolver hipnozoítos que podem levar ao reaparecimento dos sintomas em episódios denominados recaídas. No entanto, os mecanismos responsáveis pela ativação desses hipnozoítos ainda são desconhecidos. O metabolismo do ferro tem sido associado com o desenvolvimento de diversos organismos, inclusive Plasmodium, além de estar envolvido em distúrbios hematológicos, como a anemia. Assim, a hipótese investigada neste trabalho é que as moléculas envolvidas na homeostase do ferro podem ser utilizadas como biomarcadores de recaída e/ou de anemia através da análise dos polimorfismos C282Y e H63D no gene da hemocromatose (HFE) e C326Y/S no gene da ferroportina (FPN).

Os indivíduos analisados foram divididos segundo os dois grandes temas desse estudo: (1)indivíduos que tiveram uma ou múltiplas recaídas por P. vivax e (2) indivíduos anêmicos e não anêmicos infectados por P. vivax. A frequência do polimorfismo H63D identificada no grupo de múltiplas recaídas foi de 17%, enquanto que no grupo de uma recaída foi de apenas 2%. Não foi observada diferença significativa entre indivíduos anêmicos e não anêmicos para os polimorfismos HFE H63D e C282Y. Tanto no grupo de anemia quanto no grupo de recaída não foram encontrados os polimorfismos C326Y e C326S no gene da ferroportina. Os resultados obtidos nesse estudo evidenciam que o polimorfismo HFE H63D pode estar relacionado ao acúmulo de ferro nos indivíduos com múltiplas recaídas, sugerindo que esse polimorfismo pode ser considerado um biomarcador de múltiplas recaídas. Além disso, esses resultados abrem a perspectiva de realização de novos estudos que contribuam para a elucidação dos mecanismos que desencadeiam as múltiplas recaídas. Esses resultados podem inclusive contribuir para novas estratégias nos programas de eliminação da malária, como projetos de monitoramento de indivíduos que possuam predisposição ao acúmulo de ferro, e também resistência ao tratamento, principalmente nas áreas endêmicas.

Variabilidade genética de receptores plaquetários e componentes do inflamossoma: contribuição para a morbidade induzida por Plasmodium vivax

Plasmodium vivax tem sido reconhecido por sua capacidade de causar malária grave, oque torna prioritário os estudos acerca dos mecanismos patogênicos associados a essa espécie.Dado o caráter inflamatório exibido pela malária vivax, faz-se relevante estudar os fatoresgenéticos do hospedeiro vertebrado que podem influenciar o curso da doença. Nesse sentido,o presente trabalho investigou a influência da variabilidade genética de componentesplaquetários e do inflamossoma sobre a morbidade na infecção por P. vivax. Maisespecificamente, a primeira hipótese avaliada foi a de que alterações clínicas e hematológicasna malária vivax estão envolvidas com polimorfismos em genes de receptores plaquetários,relacionados ao aumento da adesão e/ou agregação das plaquetas: integrina α2 (C807T),integrina β3 (T1565C) e glicoproteína GPIbα (T-5C). A partir do estudo de aproximadamente200 indivíduos sintomáticos infectados por P. vivax, foi possível confirmar que ospolimorfismos do receptor para colágeno (α2) e do receptor para fator de von Willebrand(GPIbα) estão associados a duas das complicações mais frequentes na malária:trombocitopenia grave e anemia. A segunda hipótese investigada foi a de que polimorfismosem genes de componentes do inflamossoma – plataforma molecular capaz de desencadear aprodução de citocinas inflamatórias – estão associados à morbidade em pacientes infectadospor P. vivax. Nossos achados confirmaram essa hipótese e sugeriram que polimorfismos nosgenes de NLRP1, NLRP3 e CARD8 podem contribuir para as alterações clínicas ehematológicas observadas nos indivíduos estudados. Em conjunto, os dados aqui apresentadosconstituem a primeira demonstração de que a variabilidade genética de receptoresplaquetários e componentes do inflamossoma pode influenciar na patogenia da maláriacausada por P. vivax. Estudos futuros visando esclarecer o papel da cascata de coagulação inflamaçãona morbidade dessa doença fazem-se necessários.

Associação entre bimarcadores imunogenéticos e a gravidade ou resistência na malária por plasmodium vivax / Association between immunogenic markers and the severity and resistance in plasmodium vivax malaria

INTRODUÇÃO: A malária é uma das doenças infecto-parasitárias mais incidentes no mundo com grande morbimortalidade. Dentre as espécies infectivas ao ser humano, o Plasmodium vivax é a espécie predominante no Brasil, quase que exclusivamente na Região Amazônica. O espectro clínico da malária abrange desde uma infecção assintomática até casos moderados,com hiperbilirrubinemia isolada ou graves. A produção de mediadores inflamatórios pelo sistema imune, a via de metabolização do heme e os níveis sistêmicos de hepcidina são importantes mecanismos associados afisiopatologia dos diferentes desfechos clínicos da malária. Além disso, coinfecções podem modular ou intensificar a resposta imune de indivíduos infectados pelo plasmódio. OBJETIVO: Neste ínterim, a identificação de biomarcadores confiáveis tanto de gravidade ou resistência são indispensáveis para o auxílio no seguimento, diagnóstico e terapêutica da malária...

INTRODUCTION: Malaria is one of the most frequent infectious diseases inthe world with high morbidity and mortality. Among the infective species tohumans, Plasmodium vivax is the most predominant species in Brazil, withdisease incidence almost exclusively observed in the Amazon Region. Theclinical spectrum of malaria can range from asymptomatic infection to mildcases, malaria with isolated hyperbilirubinaemia or severe infection. Theimmune system production of inflammatory mediators, the heme metabolismpathway and systemic levels of hepcidin are important mechanismsassociated with pathophysiology of different malaria clinical outcomes. Inaddition, co-infections can modulate or enhance the immune response ofindividuals infected with P. vivax. OBJECTIVE: In this context, the identification of reliable biomarkers for disease severity and resistance are essential for the diagnosis, treatment and follow-up of malaria...

Variabilidade genética de receptores plaquetários e componentes do inflamossoma: contribuição para a morbidade induzida por Plasmodium vivax / Genetic variability of platelet receptors and inflamossoma components: contribution to the morbidity induced by Plasmodium vivax

Plasmodium vivax tem sido reconhecido por sua capacidade de causar malária grave, oque torna prioritário os estudos acerca dos mecanismos patogênicos associados a essa espécie.Dado o caráter inflamatório exibido pela malária vivax, faz-se relevante estudar os fatoresgenéticos do hospedeiro vertebrado que podem influenciar o curso da doença. Nesse sentido,o presente trabalho investigou a influência da variabilidade genética de componentesplaquetários e do inflamossoma sobre a morbidade na infecção por P. vivax. Maisespecificamente, a primeira hipótese avaliada foi a de que alterações clínicas e hematológicasna malária vivax estão envolvidas com polimorfismos em genes de receptores plaquetários,relacionados ao aumento da adesão e/ou agregação das plaquetas: integrina α2 (C807T),integrina β3 (T1565C) e glicoproteína GPIbα (T-5C). A partir do estudo de aproximadamente200 indivíduos sintomáticos infectados por P. vivax, foi possível confirmar que ospolimorfismos do receptor para colágeno (α2) e do receptor para fator de von Willebrand(GPIbα) estão associados a duas das complicações mais frequentes na malária:trombocitopenia grave e anemia. A segunda hipótese investigada foi a de que polimorfismosem genes de componentes do inflamossoma – plataforma molecular capaz de desencadear aprodução de citocinas inflamatórias – estão associados à morbidade em pacientes infectadospor P. vivax. Nossos achados confirmaram essa hipótese e sugeriram que polimorfismos nosgenes de NLRP1, NLRP3 e CARD8 podem contribuir para as alterações clínicas ehematológicas observadas nos indivíduos estudados. Em conjunto, os dados aqui apresentadosconstituem a primeira demonstração de que a variabilidade genética de receptoresplaquetários e componentes do inflamossoma pode influenciar na patogenia da maláriacausada por P. vivax. Estudos futuros visando esclarecer o papel da cascata de coagulação inflamaçãona morbidade dessa doença fazem-se necessários...

Suscetibilidade e resposta imune de mosquitos Anopheles (Diptera: Culicidae) da Região Amazônica Brasileira quando infectados experimentalmente por Plasmodium vivax

A malária é um problema de saúde pública. O Brasil é o país sul-americano que mais casos aporta todo ano, a maioria deles ocorridos na região Amazônica. Até o presente não há nenhuma vacina eficaz contra a malária. O controle dessa doença baseia-se principalmente no combate vetorial. Um dos desafios atuais é encontrar novas moléculas úteis para bloquear a transmissão da malária no vetor, sendo necessário para isso conhecer a biologia da interação entre os parasitos e seus hospedeiros. A maioria dos grupos de pesquisa utiliza como modelos de laboratórios combinações não naturais de Anopheles – Plasmodium. Neste trabalho foi avaliada a suscetibilidade ao P. vivax em espécies Amazônicas de Anopheles, fêmeas de Anopheles darlingi, An. albitarsis s.l., An. nuneztovari s.l. e An. triannulatus s.l. e An.aquasalis foram infectadas com P. vivax utilizando um sistema de infecção experimental por membrana artificial.

Todas as espécies de Anopheles estudadas foram suscetíveis à infecção por P. vivax, porém a taxa de infecção e o numero de oocistos variaram significativamente entre elas. An. aquasalis (Spearman rho = 0.255, n = 386, p < 0.01) e An. darlingi (rho =0.518; n = 54, p < 0.01) mostraram uma correlação positiva entre o número de gametócitos e o número de oocistos formados. Também foi avaliada a via JAK/STAT de resposta imune em A. aquasalis, durante a fase tardia da infecção, e em A. darlingi, no início da infecção. A expressão dos genes STAT, PIAS e NOS foi avaliada por q-PCR. Em An. aquasalis a expressão dos genes estudados foi induzida a partir de 8 dPI (PIAS e NOS) e 12 dPI (STAT),e começou a diminuir aos 14dPI, provavelmente indicando a indução transitória desses genes na fase tardia da infecção. Em An. darlingi não foi observada a ativação dessa via imune durante a fase inicial da infecção com P. vivax. Estudos futuros devem ser realizados para saber de que forma os genes regulados pela via JAK/STAT podem modular o desenvolvimento do P. vivax em An. aquasalis, e outras vias de sinalização devem ser estudadas na resposta de An. darlingi à infecção pelo Plasmodium.

Suscetibilidade e resposta imune de mosquitos Anopheles (Diptera: Culicidae) da Região Amazônica Brasileira quando infectados experimentalmente por Plasmodium vivax / Susceptibility and immune response of Anopheles mosquitoes (Diptera: Culicidae) of the Brazilian Amazon region when experimentally infected by Plasmodium vivax

A malária é um problema de saúde pública. O Brasil é o país sul-americano que mais casos aporta todo ano, a maioria deles ocorridos na região Amazônica. Até o presente não há nenhuma vacina eficaz contra a malária. O controle dessa doença baseia-se principalmente no combate vetorial. Um dos desafios atuais é encontrar novas moléculas úteis para bloquear a transmissão da malária no vetor, sendo necessário para isso conhecer a biologia da interação entre os parasitos e seus hospedeiros. A maioria dos grupos de pesquisa utiliza como modelos de laboratórios combinações não naturais de Anopheles – Plasmodium. Neste trabalho foi avaliada a suscetibilidade ao P. vivax em espécies Amazônicas de Anopheles, fêmeas de Anopheles darlingi, An. albitarsis s.l., An. nuneztovari s.l. e An. triannulatus s.l. e An.aquasalis foram infectadas com P. vivax utilizando um sistema de infecção experimental por membrana artificial...

Todas as espécies de Anopheles estudadas foram suscetíveis à infecção por P. vivax, porém a taxa de infecção e o numero de oocistos variaram significativamente entre elas. An. aquasalis (Spearman rho = 0.255, n = 386, p < 0.01) e An. darlingi (rho =0.518; n = 54, p < 0.01) mostraram uma correlação positiva entre o número de gametócitos e o número de oocistos formados. Também foi avaliada a via JAK/STAT de resposta imune em A. aquasalis, durante a fase tardia da infecção, e em A. darlingi, no início da infecção. A expressão dos genes STAT, PIAS e NOS foi avaliada por q-PCR. Em An. aquasalis a expressão dos genes estudados foi induzida a partir de 8 dPI (PIAS e NOS) e 12 dPI (STAT),e começou a diminuir aos 14dPI, provavelmente indicando a indução transitória desses genes na fase tardia da infecção. Em An. darlingi não foi observada a ativação dessa via imune durante a fase inicial da infecção com P. vivax. Estudos futuros devem ser realizados para saber de que forma os genes regulados pela via JAK/STAT podem modular o desenvolvimento do P. vivax em An. aquasalis, e outras vias de sinalização devem ser estudadas na resposta de An. darlingi à infecção pelo Plasmodium...

Caracterização de moléculas reguladoras durante a malária vivax

No Brasil a malária ainda é considerada um grande problema de saúde pública.Embora o número de casos de malária esteja diminuindo, a incidência foi maior que 300.000 casos nos últimos dois anos. Destes casos, o Plasmodium vivax foi considerado o principal agente causador, com 90% de incidência. A resposta imune adaptativa, com oauxílio da imunidade inata, tem a função de superar as estratégias impostas pelos agentes infecciosos, levando ao controle da infecção. A ativação de células T envolve além da sinalização através do receptor de célula T (TCR), sinalização secundária desencadeadapor moléculas reguladoras. A combinação das interações mediadas por estes regula a extensão, qualidade e duração da ativação de células T e, portanto, influenciam significativamente no curso das respostas imunes em questão. O objetivo desse trabalhoé avaliar o fenótipo de células T de pacientes infectados pelo P. vivax com o foco na expressão de moléculas reguladoras como morte programada-1 (PD-1), co-estimulador induzível de células T (ICOS), antígeno 4 associado ao linfócito T citotóxico (CTLA-4), domínios de mucina e imunoglobulina de célula T (TIM-3) e gene 3 de ativaçãolinfocitária (LAG-3). Células mononucleares do sangue periférico foram coletadas de pacientes infectados pelo P. vivax em Porto Velho, RO.

Os linfócitos foram analisados por citometria de fluxo. Os resultados demonstram um aumento de citocinas inflamatórias e uma diminuição no número de linfócitos em pacientes infectados pelo P. vivax. Na literatura, a expressão desses receptores inibidores e moléculas coestimulatórias é associada com a diminuição de função de células T. Nossos resultados demonstram um aumento da expressão das moléculas citadas acima em pacientes infectados pelo P. vivax. O aumento da expressão de algumas dessas moléculas correlacionam com o dano hepático e com plaquetopenia em pacientes infectados pelo P. vivax. Além disso, foi observado um aumento da expressão de um marcador específico da proliferação celular, o Ki67, em pacientes infectados pelo P. vivax. Acaracterização fenotípica aqui realizada sugere disfuncionalidade das células T. Estudos adicionais devem ser realizados para avaliar a função destas moléculas durante a malária

Caracterização de moléculas reguladoras durante a malária vivax / Characterization of molecules regulatory during the malaria vivax

No Brasil a malária ainda é considerada um grande problema de saúde pública.Embora o número de casos de malária esteja diminuindo, a incidência foi maior que 300.000 casos nos últimos dois anos. Destes casos, o Plasmodium vivax foi considerado o principal agente causador, com 90% de incidência. A resposta imune adaptativa, com oauxílio da imunidade inata, tem a função de superar as estratégias impostas pelos agentes infecciosos, levando ao controle da infecção. A ativação de células T envolve além da sinalização através do receptor de célula T (TCR), sinalização secundária desencadeadapor moléculas reguladoras. A combinação das interações mediadas por estes regula a extensão, qualidade e duração da ativação de células T e, portanto, influenciam significativamente no curso das respostas imunes em questão. O objetivo desse trabalhoé avaliar o fenótipo de células T de pacientes infectados pelo P. vivax com o foco na expressão de moléculas reguladoras como morte programada-1 (PD-1), co-estimulador induzível de células T (ICOS), antígeno 4 associado ao linfócito T citotóxico (CTLA-4), domínios de mucina e imunoglobulina de célula T (TIM-3) e gene 3 de ativaçãolinfocitária (LAG-3). Células mononucleares do sangue periférico foram coletadas de pacientes infectados pelo P. vivax em Porto Velho, RO. Os linfócitos foram analisados por citometria de fluxo. Os resultados demonstram um aumento de citocinas inflamatórias e uma diminuição no número de linfócitos em pacientes infectados pelo P. vivax. Na literatura, a expressão desses receptores inibidores e moléculas coestimulatórias é associada com a diminuição de função de células T. Nossos resultados demonstram um aumento da expressão das moléculas citadas acima em pacientes infectados pelo P. vivax. O aumento da expressão de algumas dessas moléculas correlacionam com o dano hepático e com plaquetopenia em pacientes infectados pelo P. vivax. Além disso, foi observado um aumento da expressão de um marcador específico da proliferação celular, o Ki67, em pacientes infectados pelo P. vivax. Acaracterização fenotípica aqui realizada sugere disfuncionalidade das células T. Estudos adicionais devem ser realizados para avaliar a função destas moléculas durante a malária.

Plasmodium Vivax Malaria Complicated by Pericardial Effusion.

We describe herein an unusual and sole cardiac complication of pericardial effusion in a case of plasmodium vivax malaria.

Plasmodium vivax malaria: is it actually benign?

Plasmodium vivax [Pv] malaria is being increasingly recognized as a cause of severe malaria in children. To describe the various severe manifestations associated with vivax malaria by retrospective analysis of records. Children between the ages of 0 and 18 years with a confirmed diagnosis of Pv malaria monoinfection done by peripheral blood film [PBF] and/or rapid diagnostic test [RDT] admitted between June and September 2009 were included. Their clinical, hematological and biochemical manifestations were analyzed. Twenty-three patients of Pv malaria were retrospectively analyzed. Thrombocytopenia was present in 22 [96%] patients with counts less than 50,000/ micro L in 9 patients. Severe anemia [hgb < 5 mg/dl] was present in 8 [34%] patients. Cerebral malaria was present in 3 patients. Liver enzymes were elevated [>3 times normal] in 4 [17.3%] patients while jaundice [bilirubin > 2.5 mg/dl] was present in 2 patients [total bilirubin 5.2 mg/dl and 14.3 mg/dl]. Renal dysfunction [creatinine > 3 mg/dl] was present in 6 [26%] patients with 2 patients showing severely deranged renal functions [blood urea 168 mg/dl, 222 mg/dl and serum creatinine 5.0 mg/dl, 5.6 mg/dl, respectively]. Hypernatremia was present in one patient. One patient expired within 12 h of presentation because of severely deranged hepatic and renal dysfunction. Pv malaria can lead to unusual and fatal complications. All new guidelines should include "Severe Vivax malaria" as a clinical entity. Further research into the etiopathogenesis and treatment would be important

Malaria vivax en niños: recurrencia con dosis total estándar de primaquina administrada durante 3 frente a 7 días / Vivax malaria in children: recurrences with standard total dose of primaquine administered in 3 vs. 7 days

Introducción: se ha evaluado poco en el mundo la eficacia del tratamiento con cloroquinaprimaquina para el ataque agudo y, sobre todo, para las recurrencias del paludismo vivax en niños; esos estudios en América Latina son muy escasos y casi inexistentes en Colombia.Objetivo: evaluar la eficacia de dos dosificaciones de primaquina en menores de 18 años.Materiales y métodos: estudio clínico controlado, no enmascarado, con asignación aleatoria del tratamiento. Se evaluaron dos grupos según la dosis de primaquina: 0,50 mg/kg/día por 7 días (0,50-7) frente a 1,17 mg/kg/día por 3 días (1,17-3).Resultados: A. Curación del ataque agudo: eficacia del 100% en los dos grupos; B. Prevención de las recurrencias durante 120 días: ocurrieron recurrencias en 68,4% de los niños tratados con el esquema 1,17-3, y en 34,2% de los que recibieron el régimen 0,50-7.Conclusiones: 1. La proporción de recurrencias a los 120 días en niños tratados con el esquema 0,50-7 (34,2%) fue significativamente menor que la de los niños que recibieron el régimen 1,17-3 (68,4%). 2. El tiempo de administración de una misma dosis total de primaquina influye en su eficacia contra las recurrencias: a menos días, menor eficacia.

Introduction: Worldwide, the efficacy of cloroquine-primaquine for treating acute Plasmodiumvivax malarious attacks has not been thoroughly evaluated. In Latin America such studies arescarce, and in Colombia, almost nonexisting. Objective: To assess the efficacy of two regimens foradministration of primaquine in children aged less than18 years. Methodology: A clinical, controlled, unmasked studywas carried out, with randomized administration of twoprimaquine regimens, namely: 0.50 mg/kg/day for 7days (0.50-7) vs. 1.17 mg/kg/day for 3 days (1.17-3). Results: A. Healing of the acute attack: efficacy was100% in both groups. B. Prevention of recurrencesduring 120 days: recurrences occurred in 68.4% ofchildren treated with the 1.17-3 regimen, and in 34.2%of those receiving the 0.5-7 one. Conclusions: 1. Proportion of recurrences during the120 days follow-up was significantly lower (34.2%) inchildren receiving the 0.50-7 regimen than in thosetreated with the 1.17-3 one (68.4%). The length ofadministration of the same total dose of primaquineinfluenced its efficacy against recurrences: shorterperiods of administration were associated with lesserefficacy.

Thrombocytopenia in malaria

To determine the frequency of thrombocytopenia in Malarial Parasite [MP] positive patients. A cross-sectional study. Medical Unit-III, Ward-7, JPMC, Karachi, from June to October 2006. One hundred twenty four MP positive cases were included in the study. Infections with both Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax species were included. Complete blood picture with platelet count was obtained in all patients. Thrombocytopenia was defined as platelets count of < 150.000/cmm. Among 124 patients of MP positive, 100 [80.6%] were found to have thrombocytopenia. Over all 64 patients had Plasmodium falciparum, while 60 patients were having Plasmodium vivax infection. The frequency of thrombocytopenia was 71.87% [n=46] in falciparum and 93.33% [n=56] in vivax infection. Thrombocytopenia was a common haematological finding in patients with Plasmodium infection particularly marked in vivax species infection

Systematic review and meta-analysis of the interaction between Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax in humans.

OBJECTIVES: This study aimed to quantify the interaction between Plasmodium falciparum and R vivax and the sources of heterogeneity between studies. METHODS: We systematically reviewed three databases: Medline (1966-2001), Embase (1980-2001) and CAB-health (1976-2001). Random effects meta-analysis was applied to the data of 62 selected populations. Meta-regression was used to assess the following potential sources of heterogeneity: age-group, presence of fever, continent, temporal and spatial span of studies, and endemicity level. RESULTS: The summary odds ratio (OR) between P. falciparum and P. vivax was 0.6 (95% CI: 0.49-0.79). The minimum and maximum observed ORs were 0.01 and 10.9, respectively, and the heterogeneity test was highly significant (tau2 = 0.92, p < 0.0001)--the ORs varied over a very wide range. The ORs in longer studies and in those from areas with higher prevalence yielded smaller, more strongly negative association. This is consistent with the idea that any difference in the species' temporal patterns should decrease the OR, and more so over longer periods of time. INTERPRETATION & CONCLUSION: Although such odds ratios between Plasmodium species may be partly due to missed mixed infections when reading blood slides, the negative association between the OR and prevalence supports the existence of biological interactions such as suppression or cross-immunity between species.

Malaria in Iran: past and present situation

Malaria had being widely prevalent for a long time in Iran. Before starting any anti-malarial campaign in Iran about 60% of population was living in malaria endemic areas. In hyper-endemic areas, approximately 30 to 40% of the total mortality was due to malaria. The malariometric data, reported during 1921-1949 in the malaria surveys in some endemic areas, showed high endemicities of the disease in most parts of the country. The first malaria-training course for preliminary operations of anti-malaria campaign was started in Iran in 1945. Afterwards, in the courses conducted, mostly by the Institute of Malariology many technical personnel were trained. In 1947, for the first time DDT was used in mosquito control in a pilot study in malaria hyper-endemic villages near Tehran. It caused great reduction in malaria transmission. Anti-malarial campaign including drug prophylaxis and treatment, anti-mosquito spraying with DDT and some anti-larval control measures, carried out during 1948-1956, considerably decreased malaria infection rate in most endemic areas. In 1957, malaria eradication programme [MEP] started in Iran and up to 1980 almost interrupted malaria transmission in the north parts of the country. However, in the south parts although the infection rate considerably decreased, but due to some technical and operational problems, malaria transmission was not interrupted. Therefore, in 1980 the MEP shifted to malaria control programme [MCP] which has been continuing up to present time. From 25 species of Anopheles found in Iran, 8 species of A. stephensi, A. fluviatilis, A. culicifacies, A. pulcherimus, A. d_thali, A. superpictus, A. sacharovi and A. maculipennis are considered to be malaria vectors. The prevalent species of Plasmodia in Iran are P. falciparum and P. vivax. P. malariae is rare. The main problems, in the malaria endemic areas of the southeast parts of Iran are resistance of the main vectors to some insecticides as well as high resistance of P. falciparum to chloroquine. The total reported malaria cases in Iran from 96340 with 45% P. falciparum in 1991, gradually, decreased to 18966 with 12% P. falciparum in 2005. About 30 to 50% of malaria patients have been among foreign immigrants

Influence of malaria parasite (P. vivax) on erythrocyte aggregation: a study based on dynamic imaging and analysis.

Malaria due to P. vivax (PV) is prevalent in many countries. The present work is aimed to determine the cell-cell interaction through formation of aggregates under dynamic conditions. Blood samples are obtained from patients (n=11) suffering from PV malaria, and the normal subjects (n=10) in test tubes containing citrate phosphate dextrose (10:1.4), as an anticoagulant. The signature analysis of infected erythrocytes shows significant alterations in their shape and membrane. For aggregation analysis, erythrocyte suspension in plasma at hematocrit 5%, was placed in a glass chamber and mounted vertically on the stage of the video-microscope system. The aggregate images thus acquired show erythrocytes adhering with each other to form mash-like structures. With increase in parasitaemia, the erythrocytes show hyper-aggregation compared to that of normal cells. By processing of the sequence of recorded images during sedimentation, the various aggregation parameters are obtained. These parameters show that the formed aggregates are compact which produce distinct changes in sedimentation pattern with significantly higher sedimentation velocity compared to that in healthy blood samples. These changes in malaria could partly be responsible for alteration in blood flow through microcirculatory system.

Haematozoan parasites in Kashmiri refugees

An attempt has been made on blood survey of refugees of Kashmir settled in Muzafferabad, Azad Kashmir during July-September, 1997. A total of 300 sample specimens were collected. Among these blood films, the results showed that 7% persons suffered from malaria parasite. The prevalence of plasmodium vivax was 6.33% and that of P. falciparum was 0.67%. Infection in female was 61.9% and in male 38.1% Age wise prevalence of the disease was highest [8.4%] for age group 11-20 years and lowest [6.12%] in age group 31-40 years. Seasonal variation was also noted with the highest [9%] infection of malaria in August and lowest [5%] in September

Malaria transmission potential by Anopheles sinensis in the Republic of Korea

To evaluate the factors that determine the transmission level of vivax malaria using vectorial capacity, entomological surveys were conducted from June to August, 2000. From 6 nights of human-bait collection in Paju, the human biting rate (ma) was counted as 87.5 bites/man/night. The parity of Anopheles sinensis from human baiting collections fluctuated from 41% to 71% (average 48.8%) of which the rate gradually increased as time passed on: 35.2% in Jun.; 55.0% in July; 66.2% in Aug. From this proportion of parous, we could estimate the probability of daily survival rate of An. sinensis to be 0.79 assumed with 3 days gonotrophic cycle and the expectancy of infective life through 11 days could be defined as 0.073. Blood meal analysis was performed using ELISA to determine the blood meal source. Only 0.8% of blood meals were from human hosts. We could conclude that An. sinensis is highly zoophilic (cow 61.8%). Malaria is highly unstable (stability index < 0.5) in this area. From these data, vectorial capacity (VC) was determined to be 0.081. In spite of a high human biting rate (ma), malaria transmission potential is very low due to a low human blood index. Therefore, we could conclude that malaria transmission by An. sinensis is resulted by high population density, not by high transmission potential. For this reason, we need more effort to decrease vector population and vector-human contact to eradicate malaria in Korea.